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造血干細胞培養(yǎng)基的應(yīng)用
更新時間：2015-10-28 點擊次數(shù)：1493
目前，血清仍是動物細胞培養(yǎng)中zui基本的的添加物，尤其是在原代培養(yǎng)或者細胞生長狀況不良時，常常會先使用有血清的培養(yǎng)液進行培養(yǎng)，待細胞生長旺盛以后，再換成無血清培養(yǎng)液。細胞轉(zhuǎn)入無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)要有一個適應(yīng)過程，一般要逐步降低血清濃度，從10%減少到5%，3%，1%，直至無血清培養(yǎng)。在降低過程中要注意觀察細胞形態(tài)是否發(fā)生變化，是否有部分細胞死亡，存活細胞是否還保持原有的功能和生物學(xué)特性等。在實驗后這些細胞一般不再繼續(xù)保留，很少有細胞能夠長期培養(yǎng)于無血清培養(yǎng)基而不發(fā)生改變的。細胞轉(zhuǎn)入無血清培養(yǎng)之前，要留有種子細胞，種子細胞按常規(guī)培養(yǎng)于含血清的培養(yǎng)基中，以保證細胞的特性不發(fā)生變化。
以往培養(yǎng)造血干細胞通常使用含有胎牛血清的培養(yǎng)基，由于血清中含有抑制性成分（包括可轉(zhuǎn)化生長因子－β），而其他營養(yǎng)成分也會因為血清批次的不同而有所不同，這些都會對細胞的培養(yǎng)產(chǎn)生影響。為了減少這些可變因素的影響，特別是在研究某些特殊的調(diào)節(jié)因素或生長因子的作用時，使用不含血清的培養(yǎng)基。
造血干細胞培養(yǎng)基用于擴增骨髓、外周血以及臍帶血來源的CD34陽性細胞。它只含有人白蛋白，不含其它動物來源的組分，使其更容易用于臨床研究。配方中不含生長因子和細胞因子，使用時必須根據(jù)各自的培養(yǎng)需要加入不同的因子。通過7天和14天培養(yǎng)總有核細胞、定向前體細胞、早期前體細胞或高增殖潛能克隆形成細胞檢測了該培養(yǎng)基的性能，在CFU分析中前體細胞具有自我更新的能力。
造血干細胞培養(yǎng)基具有光明的臨床治療前景。然而，常用培養(yǎng)基含有胎牛血清（FBS），增加了病原體、異種抗原、批間不穩(wěn)定性。
